特別是
氨基液相色譜柱的填裝,需要有較高的技巧和熟練的技能。因此,有人甚至將“裝柱”看作是“藝術加技術”。但是,只要掌握了一些基本的規律和方法,任何實驗室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。當然,目前大多數實驗室多是購買商品預填裝柱來滿足分離、分析之需。但是在一些有特殊需要的情況下,或為節省經費,在實驗室中自行填裝氨基液相色譜柱還是可取的。
氨基液相色譜柱的使用說明:
1、液相色譜柱使用前注意事項:
液相色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
2、流動相:
流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水較好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜系統中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規硅膠為基質的鍵合相填料通常的pH值適用范圍。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來所使用的流動相。
3、樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預處理柱對樣品進行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時,所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。